Клеточное обновление в слизистой оболочке желудка и кишечника

В настоящее время имеются свидетельства, что PCNA участвует не только в пролиферации клеток, но и в "ремонте" ДНК после ее повреждения (10). что делает данный антиген условно специфичным к клеточному циклу, так как ремонт ДНК может осуществляться и в фазе покоя. Экспрессия мРНК PCNA может индуцироваться факторами роста TGFa и EGF и онкогенами (myb, р53), поэтому PCNA может экспрессироваться в большей степени в тканях прилежащих к опухолевой, и, следовательно. будет больше клеток с меткой, чем в действительности пролифериру- ющих. С другой стороны, в нижней части ворсинок тонкой кишки наблюдается лишь слабое окрашивание PCNA. что может быть объяснено большим временем полужизни белка. Этим же можно объяснить и тот факт, что PCNA может сохраняться в клетках какое-то время и после выхода клетки из цикла. Таким образом, в начале 90-х годов стало ясно, что необходимо найти антиген более достоверно ассоциированный с фазами клеточного цикла и коротким периодом полужизни.

Таким антигеном стал Ki-67 (11). Он представляет собой белок, имеющий молекулярную массу 345 и 395 kDa и кодирующийся одним геном, расположенным на 10-й хромосоме. Экспрессия Ki-67 наступает во время фазы Gi, затем в течение клеточного цикла нарастает и резко уменьшается после митоза (12). Он так же. как и PCNA. не связан с гистоном и эволюциоино консервативен. В отличие от PCNA он не участвует в "ремонте" ДНК (13). У него также значительно меньше время полужизни. Использование антитела клона MIB-1 позволило определять Ki-67 на парафиновых срезах, однако без микроволновой обработки срезов в нормальных тканях он не выявлялся (13). Исключение составляли биопсии, для фиксации которых использовалась жидкость Карнуа.

При сравнении экспрессии PCNA и Ki-67 существует определенная корреляция, однако при сравнительных исследованиях этих маркеров с БрдУ оказалось, что экспрессия Ki-67 довольно точно соответствовала распределению метки БрдУ (14). Авторы отмечают, что индекс метки PCNA коррелировал с индексом метки БрдУ. однако в отличие от Ki-67 распределение метки в ткани не соответствовало таковому БрдУ. Проведенное недавно сравнительное исследование PCNA и Ki-67 в толстой кишке показало, что последний давал более специфическое окрашивание. но испытывал большую зависимость от режима обработки.

трации антител* а также наблюдалось уменьшение специфического окрашивания, если изучались препараты, фиксированные более 7 дней назад (15). И хотя авторы отмечают, что при надлежащем ко!гтроле PCNA лает вполне удовлетворительные результаты, они рекомендуют использовать Ki-67. Некоторые сравнительные характеристики наиболее часто используемых методов оценки пролиферации приведены нами в таблице 2.